| genet. |
oligonucleotide-directed mutagenesis (метод введения мутаций в специфические сайты клонированной ДНК с помощью мутантных олигонуклеотидов – мутагенизируемую последовательность нуклеотидов переводят в одноцепочечную форму (напр., в составе вектора на основе ДНК фага М13) и комплементарную цепь синтезируют in vitro, используя в качестве затравки для ДНК-полимеразы олигонуклеоид, содержащий требуемую мутацию, после трансформации бактериальных клеток образовавшимся гетеродуплексом и первого раунда репликации образуются мутантная и нормальная формы ДНК, которые затем разделяют биохимическими методами; метод С. -с. м. разработан в 1978 dimock); site-specified oligonucleotide-directed mutagenesis (метод введения мутаций в специфические сайты клонированной ДНК с помощью мутантных олигонуклеотидов – мутагенизируемую последовательность нуклеотидов переводят в одноцепочечную форму (напр., в составе вектора на основе ДНК фага М13) и комплементарную цепь синтезируют in vitro, используя в качестве затравки для ДНК-полимеразы олигонуклеоид, содержащий требуемую мутацию, после трансформации бактериальных клеток образовавшимся гетеродуплексом и первого раунда репликации образуются мутантная и нормальная формы ДНК, которые затем разделяют биохимическими методами; метод С. -с. м. разработан в 1978 dimock) |
